Mito 1: “As polimerases de alta fidelidade são muito caras”
É verdade que o custo por reação de uma polimerase de alta fidelidade pode ser maior do que o de uma Taq polimerase convencional. Mas e se considerarmos o custo total do experimento?
- Menos repetições: Ao reduzir drasticamente os erros de replicação, diminui-se a necessidade de repetir reações que falharam.
- Economia na validação: Os produtos gerados apresentam menos mutações indesejadas, o que reduz os custos de clonagem, sequenciamento e validação.
- Otimização do tempo: O tempo do pesquisador é um recurso valioso. Evitar erros significa menos horas gastas repetindo e resolvendo problemas.
Em resumo, o investimento inicial em alta fidelidade pode gerar economias significativas a médio e longo prazo. Se você ainda estiver preocupado com o preço, confira nossa promoção da polimerase Ampliqon de alta fidelidade e aproveite o desconto.
Mito 2: "Não preciso de tanta fidelidade para a maioria dos testes de PCR"
Depende da finalidade do seu teste PCR.
Se seu único objetivo é visualizar um fragmento de DNA em um gel , uma polimerase padrão pode ser suficiente. Mas se o produto da PCR for clonado, sequenciado, expresso ou usado em aplicações subsequentes , mesmo um único erro a cada 10.000 bases pode ser crítico.
Um simples erro pode introduzir uma mutação indesejada que passa despercebida até estágios avançados do projeto, quando o custo de corrigi-la é muito maior.
Se o produto da PCR tiver uma utilização subsequente sensível a erros, a alta fidelidade é uma garantia essencial.
Mito 3: “As polimerases de alta fidelidade são difíceis de usar”
Atualmente, as polimerases de alta fidelidade são projetadas para serem tão fáceis de usar quanto uma Taq convencional:
- Eles vêm com buffers otimizados e protocolos claros.
- Funcionam bem em ciclos padrão e são compatíveis com PCR rápida e gradientes.
- Muitas versões são robustas contra inibidores e condições variáveis.
Leia nosso artigo sobre erros comuns e como evitá-los ao usar polimerases.
Quando vale a pena escolher uma polimerase de alta fidelidade?
Quando o seu teste PCR for a etapa anterior a:
- Clonagem
- Sequenciamento (Sanger ou NGS)
- mutagênese direcionada
- Expressão de proteínas
No entanto, você pode usar o Taq convencional se:
- O objetivo é simplesmente visualizar um fragmento em um gel.
- O produto não apresentará problemas de detecção de erros em usos subsequentes.
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