Em HPLC, existem acessórios que podem parecer secundários, mas desempenham um papel fundamental na estabilidade do sistema e na vida útil da coluna. Estamos nos referindo a filtros em linha, pré-filtros e pré-colunas.
Por que usá-los se eles não vêm com o equipamento?
Embora nem sempre façam parte do sistema padrão, esses elementos previnem muitos dos problemas decorrentes do uso de fases móveis complexas ou amostras impuras . Sua principal função é atuar como uma barreira: eles capturam partículas, detritos ou contaminantes antes que cheguem à coluna analítica.
- Filtros online
Esses filtros podem ser instalados a montante da coluna, na saída da cabeça da bomba ou na saída da válvula de injeção do amostrador automático. Eles protegem o leito de amostra de partículas indesejadas. Não substituem a filtração da amostra (que deve sempre ser feita com filtros de seringa de 0,45 µm ou 0,2 µm), mas fornecem uma segunda linha de defesa que ajuda a manter a pressão estável e prolonga a vida útil do sistema.
Um detalhe importante: o tamanho dos poros do filtro em linha deve ser menor que o da frita de entrada da coluna. Por exemplo, se sua coluna tiver partículas de 5 µm e a frita tiver 2 µm, o filtro em linha deverá ter um tamanho de poro de 1 a 0,5 µm.
Você percebe que a pressão do sistema está começando a subir? O filtro em linha pode estar entupido. Verifique-o e substitua-o, se necessário.
- Pré-colunas: um investimento inteligente
Elas atuam como um "fusível" no sistema: são projetadas para reter compostos que poderiam aderir irreversivelmente à coluna analítica , protegendo-a da contaminação permanente. Portanto, é importante que possuam uma fase estacionária igual ou muito semelhante à da coluna principal.
A vida útil das colunas depende de muitos fatores: a composição da fase móvel, o volume injetado, a pureza das amostras, o pH… À medida que se contaminam ou entopem, nota-se um aumento da pressão e alterações nos picos , como alargamento ou divisão.
