O estudo dos danos ao DNA e da resposta celular ao seu reparo é fundamental na biologia molecular, na pesquisa do câncer e no desenvolvimento de novos medicamentos. Quebras de fita simples (SSBs) e quebras de fita dupla (DSBs), assim como outras modificações químicas, podem comprometer a estabilidade genômica das células e levar à morte celular se não forem reparadas adequadamente. Para compreender esses processos, a Revvity desenvolveu o kit de coloração para resposta a danos no DNA PhenoVue™ .
Você estuda como as células detectam e reparam danos ao DNA por meio de vias de resposta? Deseja monitorar a ativação de vias de resposta a danos no DNA ou rastrear drogas genotóxicas? Se sim, continue lendo.
Por que é importante analisar os danos ao DNA?
As células possuem um mecanismo sofisticado conhecido como resposta ao dano ao DNA (DDR) para detectar e reparar lesões em seu material genético. Um dos primeiros eventos após uma quebra de dupla fita é a fosforilação de H2AX , que leva à formação de γ-H2AX , um marcador amplamente utilizado para identificar esses pontos de quebra. Esse processo também recruta proteínas-chave, como a 53BP1 , que ajudam a coordenar o reparo do DNA. O estudo desses marcadores é essencial para avançar nossa compreensão da biologia do câncer, da estabilidade genômica e da ação de novos tratamentos.
O que o kit de coloração para resposta a danos no DNA PhenoVue™ oferece?
O kit de coloração PhenoVue™ para resposta a danos no DNA foi desenvolvido para facilitar a análise da resposta a danos no DNA (DDR) utilizando técnicas de imagem de alto conteúdo.
O kit inclui:
🔹 Anticorpos específicos contra γ-H2AX e 53BP1, validados para uso em ensaios celulares.
🔹 PhenoVue Hoechst 33342 para coloração nuclear precisa.
🔹 Fluoróforos otimizados (PhenoVue Fluor 488 e Fluor 647) que garantem um sinal nítido sem sobreposição espectral.
Graças a essa combinação, o kit permite a obtenção de imagens de alta qualidade que mostram claramente os focos nucleares onde a atividade de reparo do DNA está concentrada. Ele é compatível com outros corantes fluorescentes, ampliando as possibilidades para ensaios multiparamétricos.
Como isso é aplicado em laboratório?
O fluxo de trabalho é simples e otimizado para laboratórios que utilizam sistemas de análise de alta resolução e alto conteúdo, como o Opera Phenix™ Plus ou o Operetta CLS™ :
1. Fixação e permeabilização celular.
2. Incubação com anticorpos primários contra γ-H2AX e 53BP1.
3. Coloração com Hoechst e anticorpos secundários fluorescentes.
4. Captura e análise de imagens.
Este kit é ideal para estudos de estabilidade genômica , triagem de fármacos antitumorais ou ensaios de toxicidade genotóxica .
Em que situação nossa equipe pode te ajudar?
Se desejar obter mais informações sobre o kit de coloração de resposta a danos no DNA PhenoVue™ , seu uso em diferentes protocolos ou sua compatibilidade com os sistemas de imagem do seu laboratório, nossa equipe de especialistas terá prazer em ajudá-lo . Caso tenha interesse em conhecer outros kits de coloração celular, entre em contato conosco e ajudaremos você a encontrar o que melhor atende às suas necessidades.
