Em biologia celular e farmacologia, a viabilidade celular é um dos parâmetros mais críticos: saber se as células estão vivas, responsivas ou morrendo define o sucesso de experimentos de citotoxicidade, proliferação ou triagem. Para isso, a família ATPlite™ da Revvity oferece uma plataforma luminescente altamente otimizada baseada na detecção de ATP, fornecendo dados sensíveis, reproduzíveis e rápidos para múltiplos modelos celulares.
O ATP (adenosina trifosfato) está presente em todas as células metabolicamente ativas; sua concentração cai rapidamente quando as células morrem por necrose ou apoptose. Portanto, o monitoramento do ATP é um parâmetro direto e confiável para avaliar a viabilidade, o crescimento ou a morte celular.
Por que usar o ATPlite™?
- ATPlite™ baseia-se na reação da luciferase de vaga-lume com a D-luciferina para gerar luz proporcional ao ATP liberado, permitindo a quantificação direta e altamente sensível da atividade celular.
- Em comparação com métodos colorimétricos, fluorescentes ou radioisotópicos, o ATPlite™ oferece um ensaio mais simples (sem lavagem ou centrifugação em muitas versões) e altamente reprodutível.
Versatilidade para diferentes modelos celulares
A gama ATPlite™ foi concebida para se adaptar a diferentes necessidades de laboratório, abrangendo tanto sistemas 2D tradicionais como modelos 3D mais avançados (esferoides e organoides):
- ATPlite™ (versão básica, 2 etapas): Permite um sinal de luz muito estável, com duração que pode ultrapassar 5 horas, oferecendo flexibilidade para leituras mesmo sem injetores sofisticados.
- ATPlite™ 1-step: Projetado para ambientes de alto desempenho ou automação; permite uma única etapa ("adicionar e ler"), reduzindo tempo e complexidade.
- ATPlite™ 3D: Otimizado para esferoides e organoides; inclui uma etapa de lise com hidróxido de sódio para extrair ATP de estruturas celulares densas e fornece um sinal de luz muito estável.
- ATPlite™ 1step 3D: Projetado para máxima simplicidade em modelos 3D, requer apenas uma adição de reagente e é compatível com processos contínuos.
- ATPlite™ 1glow: Fornece um sinal luminoso prolongado de mais de 3 horas, ideal para análises em lote ou quando a leitura pode ser adiada.
- ATPlite™ 1glow F: Formato líquido congelado pronto para uso, projetado para aplicações de alto desempenho, com ótima estabilidade de sinal e alta sensibilidade.
Principais benefícios no laboratório
- Alta sensibilidade : o ATPlite™ consegue detectar até mesmo quantidades muito baixas de ATP, permitindo que funcione com poucas células.
- Leitura estável : sua formulação proporciona um sinal luminoso de longa duração, reduzindo a pressão de leitura imediata.
- Fluxos simplificados : com protocolos homogêneos (muitos kits são do tipo "adicionar-misturar-ler"), a necessidade de lavagens e etapas intermediárias é eliminada.
- Compatibilidade com automação : especialmente com formatos de 1 etapa ou de sinal longo, ideal para triagem ou laboratórios robotizados.
- Segurança e facilidade de manuseio : alguns kits não contêm DTT, o que reduz os riscos toxicológicos e os odores desagradáveis.
- Ampla faixa dinâmica : permite a quantificação de ATP em diferentes níveis celulares, desde algumas poucas células até esferoides densos.
Aplicações recomendadas
Os ensaios ATPlite™ são ideais para uma ampla variedade de estudos:
- Ensaios de citotoxicidade : para avaliar o efeito de fármacos, compostos biológicos ou toxinas na viabilidade celular.
- Proliferação celular : quantificando o crescimento celular sob diferentes condições.
- Modelos 3D : medição da viabilidade em esferoides e organoides, que mimetizam melhor o ambiente fisiológico.
- Triagem farmacológica : Com sua alta compatibilidade e sinal estável, o ATPlite™ é perfeito para plataformas automatizadas.
- Pesquisa básica : estudos de sinalização, morte celular ou metabolismo energético.
Como implementar o ATPlite™ em seu laboratório
- Escolha o kit de acordo com o seu modelo de célula (2D ou 3D) e fluxo de trabalho (manual ou automatizado).
- Prepare uma curva padrão de ATP para quantificar os resultados, se necessário.
- Adicione o reagente de acordo com o protocolo (“1 etapa” ou “2 etapas”), misture e meça a luminescência.
- Analise os dados: a luz gerada é proporcional ao ATP, o que se traduz na viabilidade ou atividade metabólica das suas células.
A linha ATPlite™ da Revvity é uma solução versátil, robusta e altamente sensível para medir a viabilidade celular em uma ampla gama de contextos, desde estudos simples de monocamadas até modelos 3D avançados ou plataformas automatizadas. Seu design otimizado reduz a complexidade operacional, maximiza a reprodutibilidade e permite a aquisição confiável de dados em menos etapas.
Se você busca uma ferramenta luminescente para quantificar ATP e entender melhor o estado de suas células, o ATPlite™ é uma das opções mais completas e confiáveis. Estamos prontos para ajudar.
